圓二色譜即
圓二色光譜，是一項(xiàng)依據(jù)光學(xué)活性分子的圓二色性（circular dichroism，CD）發(fā)展而來(lái)的光譜分析技術(shù)。光學(xué)活性分子具有不對(duì)稱空間結(jié)構(gòu)，當(dāng)平面偏振光經(jīng)過(guò)光活性物質(zhì)時(shí)，其對(duì)左、右圓偏振光的吸收度不同，導(dǎo)致左、右圓偏振光變成橢圓偏振光，常用于解析這些分子的二級(jí)和三級(jí)構(gòu)象。大多數(shù)具有活性的生物大分子由于其不對(duì)稱的空間結(jié)構(gòu)都具有光學(xué)活性，均可作為圓二色譜研究的對(duì)象，如典型的蛋白質(zhì)。
利用圓二色譜進(jìn)行蛋白質(zhì)或多肽結(jié)構(gòu)分析時(shí)，首先要制備滿足檢測(cè)條件的樣品，需要注意的是緩沖液的選擇、蛋白濃度以及純度。圓二色譜通常以蛋白稀溶液為檢測(cè)對(duì)象，因此需將蛋白樣品完全溶解在緩沖液或溶劑中，使其形成均一、透明的蛋白溶液。緩沖液和溶劑的選擇特別重要，成分中應(yīng)盡量避免任何含有光吸收的物質(zhì)，以免產(chǎn)生雜信號(hào)造成實(shí)驗(yàn)誤差。最好選擇透明性極好的磷酸鹽和Tris-HCl等作為緩沖液。此外，蛋白質(zhì)/多肽的精確濃度是計(jì)算樣品二級(jí)結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵，一般應(yīng)保證蛋白/多肽的濃度不低于0.5 mg/mL。樣品不能添加任何保護(hù)劑或其它物質(zhì)，蛋白/多肽純度要在90%以上。
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